健脾补肾方对肌萎缩侧索硬化小鼠的干预效果及作用机制

目的 探索健脾补肾方对肌萎缩侧索硬化（ALS）模型小鼠运动功能的影响及其机制。方法 将12只采取转基因法繁育的保留部分运动功能的ADAR2flox/flox/VAChT-Cre小鼠（AR2小鼠）随机分为模型组和治疗组，每组6只；以6只同批次野生型（WT）小鼠为对照组。治疗组小鼠灌胃给予健脾补肾方[30 g/（kg·d）]，对照组和模型组小鼠灌胃给予0.2 mL氯化钠溶液（9 g/L），每日1次，连续干预8周。每周观察小鼠活动状况、体质量以及抓力、抗疲劳能力（滚轮测试）等行为学功能。第24周后取样，采用苏木精-伊红（HE）染色法、尼氏染色法观察各组小鼠脊髓前角组织病理变化，采用Western blot法检测各组小鼠脊髓组织中作用于RNA的腺苷脱氨酶2(ADAR2)、转录反应DNA结合蛋白-43(TDP-43)的蛋白表达量，透射电镜观察小鼠脊髓组织超微结构。结果 与对照组比较，模型组小鼠体质量随周龄逐渐增长；与模型组比较，治疗组小鼠体质量降低。与对照组比较，模型组小鼠与治疗组小鼠抗疲劳程度均有所下降，但是治疗组小鼠的抗疲劳能力下降相对模型组有所延缓。与对照组比较，模型组小鼠抓力下降；与模型组比较，治疗组抓力下降相对减缓。与对照组相比，模型组TDP-43表达量显著降低（P0.05）。与对照组相比，模型组脊髓前角运动神经元损伤严重，神经元结构不完整；与模型组相比，治疗组神经细胞凋亡数量减少。透射电镜下，模型组与对照组比较出现明显的线粒体肿胀凋亡、髓鞘脱散现象；治疗组与对照组相比较存在部分髓鞘脱散、线粒体肿胀，相对于模型组，存在肿胀凋亡现象的神经细胞数量有所减少。结论 健脾补肾方能延缓ALS模型小鼠运动功能的减退，减少脊髓运动神经元的凋亡和损伤，阻止散发性ALS(sALS)病理异常标志物TDP-43的生成，保护脊髓神经元有髓神经纤维与线粒体，有效延缓ALS小鼠疾病的进展与功能的丧失。